在WB過程中從SDS-PAGE膠上轉移蛋白至膜上是非常關鍵的步驟！優化轉移時間往往需要實驗多次，下面就講幾條關于如何保證蛋白完全轉移的小技巧，適合新手參考:
使用預染的marker 預染marker不僅能夠直觀的觀察到跑膠情況，而且在轉移過程中也是很好的工具，在完成印跡后觀察膜上的 marker ，看是否所有條帶都已經轉移至膜上。
在轉印裝置中加兩塊膜 小分子量的蛋白轉移的比較快，而為保證大分子蛋白的轉印，長時間的轉印可能使小分子蛋白透過膜，因此，可以加入兩塊膜，如果能在第二塊膜上檢測到小分子蛋白，說明轉印時間過長。
在轉印后對膠染色 如果轉印時間不夠優化，通過對膠染色，在膠上能夠觀察到未轉移完全的蛋白，這種情況在轉印大分子蛋白是常見，使用銀染或者考馬斯亮藍的方法都可以。
二、Western blot轉印的優化
從SDS凝膠中進行Western蛋白轉印的優化需要對一系列參數進行考慮。目的是轉印所有凝膠上的蛋白并將其定 |
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