CRISPR/Cas系統(tǒng)是目前發(fā)現(xiàn)存在于大多數(shù)細(xì)菌與所有的古菌中的一種后天免疫系統(tǒng),其以消滅外來的質(zhì)體或者噬菌體并在自身基因組中留下外來基因片段作為“記憶”。
CRISPR/Cas系統(tǒng)全名為常間回文重復(fù)序列叢集/常間回文重復(fù)序列叢集關(guān)聯(lián)蛋白系統(tǒng)(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins)。目前已發(fā)現(xiàn)三種不同類型的 CRISPR/Cas系統(tǒng),存在于大約40%和90%已測(cè)序的細(xì)菌和古菌中。其中第二型的組成較為簡(jiǎn)單,以Cas9蛋白>以及向?qū)NA(gRNA)為核心的組成。由于其對(duì)DNA干擾(DNAi)的特性,目前被積極地應(yīng)用于遺傳工程中,作為基因體剪輯工具,與鋅指核酸酶(ZFN)及類轉(zhuǎn)錄活化因子核酸酶(TALEN)同樣利用非同源性末端接合(NHEJ)的機(jī)制,于基因體中產(chǎn)生去氧核糖核酸的雙股斷裂以利剪輯。二型CRISPR/Cas并經(jīng)由遺傳工程的改造應(yīng)用于哺乳類細(xì)胞及斑馬魚的基因體剪輯。其設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單以及操作容易的特性為大的優(yōu)點(diǎn),未來將可應(yīng)用在各種不同的模式生物當(dāng)中。
我們今天稱為CRISPR的基因組重復(fù)叢集,即原核生物擬核DNA鏈中的叢生重復(fù)序列,在1987關(guān)于E |